Trong quy trình tinh chế một hoạt chất dược, hỗn hợp chứa tạp chất có độ hòa tan khác nhau. a. Trình bày quy trình tinh chế kết hợp kết tinh lại và sắc ký để đạt độ tinh khiết >99%. b. Nêu phương pháp...

a. Quy trình tinh chế kết hợp giữa kết tinh và sắc ký có thể được thực hiện theo các bước sau: 1. **Kết tinh**: Đầu tiên, hòa tan hỗn hợp chứa hoạt chất và tạp chất trong dung môi thích hợp. Điều chỉnh nhiệt độ để cho hoạt chất tinh thể xuất hiện trong dung dịch. Sau đó, làm lạnh từ từ dung dịch để thu được tinh thể hoạt chất. Tinh thể này sẽ có độ tinh khiết cao hơn so với dung dịch ban đầu do tạp chất có độ hòa tan khác. 2. **Tách chiết**: Sau khi thu được tinh thể, tách chúng ra khỏi dung dịch bằng cách lọc chân không hoặc lọc thường. 3. **Rửa sạch**: Rửa tinh thể bằng dung môi lạnh để loại bỏ tạp chất còn lại. 4. **Sắc ký**: Sử dụng sắc ký (có thể là sắc ký cột hoặc sắc ký lớp mỏng) để tách các tạp chất còn lại. Đối với sắc ký cột, sử dụng chất liệu hấp phụ thích hợp và dung môi elution để thu được các phần tinh khiết hơn. 5. **Kiểm tra độ tinh khiết**: Sau khi hoàn thành quy trình sắc ký, kiểm tra độ tinh khiết của sản phẩm bằng các phương pháp phân tích thích hợp. b. Các phương pháp kiểm tra độ tinh khiết bao gồm: 1. **HPLC (High-Performance Liquid Chromatography)**: Là phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao, cho phép phân tích chính xác hàm lượng hoạt chất và tạp chất. Tiêu chí chấp nhận thường yêu cầu độ tinh khiết lớn hơn 99%. 2. **Nhiệt độ nóng chảy (Melting Point)**: Đo nhiệt độ nóng chảy của hoạt chất, độ tinh khiết cao sẽ cho nhiệt độ nóng chảy nhất quán với giá trị lý thuyết. 3. **NMR (Nuclear Magnetic Resonance)**: Phân tích cấu trúc phân tử và xác định sự có mặt của tạp chất. Tiêu chí chấp nhận là không có tín hiệu nào của tạp chất trong phổ NMR. c. Nếu tạp chất là đồng phân cấu tạo khó tách, có thể sử dụng một số biện pháp như sau: 1. **Sắc ký chiral**: Nếu hoạt chất và tạp chất là đồng phân quang học, có thể sử dụng sắc ký chiral để tách chúng ra dựa trên sự khác biệt trong tương tác với chất nền. 2. **Thay đổi điều kiện kết tinh**: Thay đổi nhiệt độ, nồng độ hoặc sử dụng dung môi khác để cải thiện khả năng tách biệt đồng phân. 3. **Phản ứng hóa học**: Thực hiện các phản ứng hóa học đặc hiệu để chuyển đổi một trong các đồng phân thành sản phẩm khác dễ tách ra hơn, sau đó tái tạo lại hoạt chất cần thiết. 4. **Tách chiết bằng dung môi**: Sử dụng dung môi có khả năng hòa tan chọn lọc để tách đồng phân ra khỏi hỗn hợp. Hy vọng các thông tin trên sẽ giúp ích cho bạn trong việc tinh chế hoạt chất dược.